Что означают термины «без пирогенов», «без рибозимов» и «без эндотоксинов», часто используемые для лабораторных расходных материалов?

Jan 06, 2023Оставить сообщение

Не знаю, часто ли нужно покупать расходные материалы. Если вы часто покупаете лабораторные расходные материалы, вы можете обнаружить, что различные производители могут маркировать свою продукцию как не содержащую ферментов, пирогенов и эндотоксинов, особенно для расходных материалов, связанных с клеточной биологией и аналитической биологией, таких как обычные центрифужные пробирки объемом 15 мл и 50 мл, флаконы для клеточных культур, чашки для культивирования клеток, планшеты для культивирования клеток, пробирки для криоконсервации, доска для ПЦР и другие продукты. Товары с такими описаниями также могут быть дороже, чем обычные аналогичные товары. Итак, каковы значения этих утверждений и как они влияют на наши эксперименты? Как мы должны делать выбор при совершении покупок? Вот краткое введение.

picture1

Определение

 

1. Пироген

Пироген относится к пирогенному веществу, которое может вызвать аномальное повышение температуры тела после введения в организм. В широком смысле пироген включает бактериальный пироген, эндогенный высокомолекулярный пироген, эндогенный низкомолекулярный пироген и химический пироген. Термин «пироген» здесь в основном относится к бактериальному пирогену, который является метаболитом некоторых микроорганизмов, бактериальными трупами и эндотоксином.

 

2. Фермент

Ферменты изучали в средней школе. В качестве биологического катализатора ферменты могут эффективно катализировать различные биохимические реакции в нашем организме. Однако, когда в большинстве продуктов говорится «нет ферментов», точнее, они имеют в виду не все ферменты, а нуклеазы. Многие производители также пишут, что не содержат ДНКазы и не содержат РНКазы. Нуклеаза может расщеплять молекулы нуклеиновых кислот. Он может специфически разрушать ДНК или РНК, а также может действовать как на молекулы ДНК, так и на РНК с низкой специфичностью.

 

3. Эндотоксин

Эндотоксин — это общий термин для токсичных веществ, существующих в грамотрицательных бактериях. Это компонент клеточной стенки различных грамотрицательных бактерий. Это токсин, высвобождаемый после того, как клетка раскололась, и компонентом является липополисахарид. Обычно считается, что эндотоксин является пирогеном. При производстве лекарств в целом допустимо: нет эндотоксина - нет пирогена. Поэтому при производстве можно проводить только тест на эндотоксины без теста на пирогенность.

picture2

 

Влияние

 

Пироген и эндотоксин могут стимулировать организм и вызывать лихорадку. В фармацевтической, клинической и других областях в целях безопасности человека обычно предъявляются требования к количеству пирогена и эндотоксина. В Китайской фармакопее даны специальные методы обнаружения пирогенов и эндотоксинов. Когда дело доходит до молекулярных лабораторий, нуклеаза может расщеплять фрагменты молекулы-мишени, потому что она способна разлагать ДНК. Например, в экспериментах ПЦР, если нуклеаза загрязнена, значение CT может отсутствовать, что приводит к ложноположительным результатам. Поэтому расходные материалы, такие как отсос и ПЦР, обычно не содержат нуклеазы.

 

Обнаружение пирогенов и эндотоксинов

Ниже приводится краткое введение в тесты на пирогены и эндотоксины в фармакопее.

1. Тестирование на пирогены

Метод обнаружения пирогенов на кроликах описан в Общем правиле Китайской фармакопеи 1142. Используйте здоровых и квалифицированных кроликов, вводите кроликам внутривенно определенное количество тестируемого вещества и наблюдайте за повышением температуры кроликов в течение указанного времени. Посуда для испытаний, контактирующая с испытуемым изделием, должна быть стерильной и апирогенной. Пироген обычно удаляют стерилизацией сухим жаром (250 градусов, более 30 минут) или другими подходящими методами. Если температура испытуемого кролика повышается до определенного стандарта в течение определенного периода времени, считается, что тест на пирогенность испытуемого изделия не соответствует требованиям.

 

2. Тест на эндотоксин

Перед тестом на эндотоксины во всем мире использовался тест limulus. Конкретные методы включают гель-метод и фотометрический метод. Реактив Limulus может агглютинировать с бактериальным эндотоксином, вызывая изменение геля или мутности, и содержание эндотоксина можно определить путем измерения этого изменения. Лизат амебоцитов Tachypleus представляет собой своего рода реагент, извлеченный из лизата амебоцитов морского членистоногого Tachypleus. Таким образом, лизат амебоцитов Tachypleus был пойман и убит в больших количествах во всем мире, а также стал национальным животным второго класса, охраняемым в Китае. В настоящее время FDA одобрило метод рекомбинантного С-фактора для замены реагента TAL. Этот закон также упоминается в руководящих принципах Китайской фармакопеи.

picture3

Как выбрать

 

На самом деле, после понимания этих концепций сделать выбор несложно. Это в основном основано на ваших собственных потребностях. Как правило, расходные материалы без ферментов и пирогенов распространены, а продукты без эндотоксина относительно немногочисленны. Если сам эксперимент не предъявляет к ним высоких требований, можно использовать обычные расходники. Например, при центрифугировании клеток или связанных с ними компонентов лучше использовать центрифужную пробирку без ферментов и пирогенов, в то время как обычные центрифужные пробирки действительно можно использовать для обычного жидкостного центрифугирования.

 

Кроме того, это также проблема, с которой сталкиваются многие пользователи. При покупке центрифужных пробирок у некоторых предприятий они спрашивают, можно ли повторно использовать центрифужные пробирки. На самом деле, эта проблема будет обсуждаться в зависимости от ситуации, потому что центрифужные пробирки были в определенной степени загрязнены после однократного использования, и даже стерилизация паром под давлением не может полностью устранить загрязнение. Поэтому, если вы используете его снова, это зависит от собственных потребностей пользователя в эксперименте.

 

 

В конечном счете, все продукты для экспериментаторов и экспериментов. Мы не можем влиять на наши эксперименты из-за продуктов, но нам нужно выбирать подходящие продукты в соответствии с нашими экспериментами.

 

BKMAM без пирогена, без рибозима, без эндотоксина Центрифужная пробирка, 0.5 мл, 1,5 мл, 2 мл, 5 мл, 10 мл, 15 мл, 50 мл на выбор.

Без пирогенов, без рибозимов, без эндотоксинов Пробирки для криопробирок с внутренней резьбой, внешней резьбой, с 1 мл, 2 мл, 3 мл, 4 мл, 5 мл на выбор.

Добро пожаловать на заказ у нас!

Отправить запрос

whatsapp

skype

Отправить по электронной почте

Запрос